十二生肖制服水灵后，得以归位掌管纪年。升仙后，玉帝为十二生肖请来天师，教授各种本领与知识。但十二生肖自恃立下汗马功劳便惰性又生，在天庭中过着自由散漫、不学无术的生活。这种情况被巡视天庭的二郎神逮个正着

玉兄、玉弟的争斗，是在老玉帝选择接班人的比武中开始的。玉兄本性顽劣，争强斗狠，不服任何人；玉弟却与玉兄性格迥异，虽聪慧过人，武功高强，却以慈善之心待人，一腔悲悯情怀。在比武中，玉弟不忍伤害玉兄，战成平手。关键时刻，玉弟笃守诚信；玉兄则不择手段，几乎成功继位。一直到加冕仪式将要开始，玉兄的凶残嘴脸才败露，仓皇逃往人间。而此时的玉弟，正默默承受着内心极度痛苦的煎熬：他要为自己的仁慈付出代价，那就是不仅失去皇位，还将失去自己心爱的水雾仙子。

同门师兄弟保生大帝（郑少秋 饰）与瘟君（淳于珊珊 饰）千年斗法，落败下风的瘟君唆使众神向玉帝告状，列举了保生大帝种种“罪状”，玉帝（王新民 饰）大怒，将保生大帝打入凡界，并交给他一个匪夷所思的任务，把一个品行顽劣的医官培养成一个名医，否则终生不许返回天庭。由此一来，保生大帝落魄为一民间郎中吴本，但医术高超、充满智慧的吴本赢得了渔家女三红（廖家仪 饰）的垂青，遭瘟君陷害被贬下凡的黑龙（王灿 饰）白虎（陈佳佳 饰）也与吴本结成同盟不离其左右。以害人为能事的瘟君在与吴本的博弈中惨败，也被玉帝贬为凡人，但他并不甘

东胜神州的傲来国花果山的一块巨石孕育出了一只明灵石猴（六小龄童 饰），石猴后来拜须菩提为师后习得了七十二变，具有了通天本领，于是占山为王，自称齐天大圣。玉帝派太上老君下凡招安大圣上了天庭，后来大圣因为嫌玉帝赐封的官职太低，大闹天宫，被太白金星困于炼丹炉内四十九天后，大圣踢翻炼丹炉，炼成了金睛火眼。如来佛祖见局势不可收拾，于是将大圣镇压于五指山下。一晃眼五百年过去了，唐僧被观世音菩萨选为西去取经普渡众生的人，大圣受观音指引，拜唐僧为师，师徒二人踏上了取经的路途。